Des niveaux élevés d’anticorps dirigés contre la leucocidine Panton-Valentine ne sont pas associés à la résistance à l’infection de la peau et des tissus mous associée à Staphylococcus aureus

Contexte Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline et CA-MRSA exprimant la leucocidine Panton-Valentine PVL provoque une infection sévère de la peau et des tissus mous SSTI, pneumonie nécrosante et autres infections invasives La toxine PVL a été impliquée en tant que facteur de virulence, et anticorps contre un Le rôle de la PVL dans la pathogenèse reste controversé et on ne sait pas si l ‘anticorps anti – PVL sérique humain module les méthodes d’ infection. Nous avons déterminé les taux d ‘anticorps anti – PVL dans les échantillons sériques des enfants âgés de – ans présentant une chaîne de polymérase. SSTI associé à la MVL positif à la réaction, avec ou sans antécédent d’infection à SARM ou SSTI, infection invasive à SARM à PVL + et infection à SARM sans PVL, ainsi que sujets témoins non infectés Nous avons également mesuré la neutralisation à médiation par anticorps de PVL- lyse induite des cellules polymorphonucléaires humainesRésultats L ‘anticorps anti – PVL était présent chez des enfants en bonne santé. Les enfants atteints d’une infection primaire à PVL-MRSA présentaient des taux modérés d’anticorps anti-PVL qui augmentaient après l’infection. Les enfants ayant une infection antérieure par le SARM ou un SSTI présentaient des taux élevés d’anticorps anti-MRSA. d’anticorps dirigés contre la PVL après le début de l’infection MLSA PVL Il n’y avait pas d’augmentation de l’anticorps anti-PVL dans les échantillons sériques de cette population après le début de l’infection Sérum des enfants atteints de SSTI associées au SARM positif PVL, en particulier ceux ayant une infection antérieure au SARM ou SSTI, et des échantillons de sérum convalescent provenant d’enfants atteints d’infection invasive à PVRS-MRSA inhibent fortement la lyse des cellules polymorphonucléaires induite par la PVLConclusions L’anticorps neutralisant la PVL ne protège pas les enfants contre le SSTI associé au CA-MRSA primaire ou récurrent.

Au cours de la dernière décennie, le taux d’infection par le SARM de Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline a augmenté chez les adultes et les enfants. Le SARM CA cause des infections cutanées et des tissus mous SSTI et, plus rarement, des pneumonies nécrosantes. Autres infections invasives chez des patients par ailleurs en bonne santé [,,,] Aux États-Unis, S aureus type USA compte pour la plupart des CA-MRSA et, avec d’autres types de SARM, produit typiquement Panton-Valentine leucocidine PVL [, -] Bien que purifié La PVL, composée de protéines LukS et LukF, a une activité cytotoxique porogènique nette sur les PMN des polynucléaires humains, son rôle dans la pathogénie reste controversé Les études animales ont montré un rôle pathogène , aucun effet , voire un rôle antivirulence Le composant LukS, au sein d’un vaccin multivalent, est en cours d’essais cliniques chez l’homme Nous avons évalué les taux d’anticorps anti-PVL chez les enfants non infectés et chez les enfants atteints d’un SSTI associé au SARM. et infections invasives pour déterminer si les anticorps neutralisant les cytotoxiques contre la PVL étaient associés à une résistance à l’infection

Méthodes

Surveillance de l’étude Le comité de révision de l’hôpital pédiatrique de Boston a approuvé cette étude.Conception étudiante et participants Les sujets témoins non infectés étaient des enfants âgés de 5 à 9 ans. ont été prélevés à l’intérieur de la prise de sang et conservés à – ° C Les enfants ont été exclus s’ils avaient eu une infection concomitante ou des antécédents d’immunodéficience lors de la revue du dossier médical

Taux d’anticorps chez les enfants atteints d’infections à SARM Staphylococcus aureus résistantes à la méthicilline et résistantes à la méthicilline dans l’échantillon de sérum prélevé le plus près du début de l’infection chez les enfants atteints de PVL-positif et chez les enfants atteints d’infection à SARM Les valeurs médianes des taux d’anticorps anti-LukF chez les enfants atteints d’infections à SARM PVL-positives et PVL-négatives étaient ng / mL intervalle interquartile [IQR], -, ng / mL, ng / mL IQR, – ng / mL, et ng / mL d’IQR, – ng / mL, respectivement, et à LukS étaient ng / mL IQR, – ng / mL, ng / mL IQR, – ng / mL, et ng / mL IQR, – ng / mL, respectivement Contrôle de régression logistique L’âge et le jour de la maladie ont été utilisés pour comparer les patients PVL-positifs aux PVL-négatifs, et l’âge a été utilisé pour contrôler la comparaison entre les PVL positifs et les PVL-négatifs chez les sujets témoins.Les patients infectés par SARM ont été identifiés d’octobre à septembre. obtenu à partir du dossier médical revie ws et un questionnaire administré aux patients hospitalisés incluaient seulement les caractéristiques démographiques, source de culture, diagnostic, apparition de la maladie, antécédents d’infection à SARM ou SSTI, contact familial avec infection à SARM ou SSTI, immunodéficience et administration intraveineuse d’immunoglobulines IVIG Les individus étaient exclus s’ils avaient une immunodéficience ou Une souche bactérienne LAC, appartenant au type de séquence USA, a été fournie par M Otto, National Institutes of HealthPVL gène détectionS Aureus ADN a été extrait et les gènes LukS et LukF PVL ont été amplifiés avec des amorces et des protocoles précédemment décrits Purification recombinante de PVL Les gènes lukF et lukS ont été clonés séparément dans un vecteur de fusion liant le maltose, comme décrit ailleurs mitose. Les protéines recombinantes ont été purifiées selon les instructions du fabricant.Quantité des anticorps PVVL Les concentrations en anticorps dirigés contre LukF et LukS dans les IgIV pharmaceutiques ont été déterminées par im lié ELISA utilisant un IgG total connu en tant que standard Des puits revêtus d’anticorps dirigés contre la chaîne IgG humaine IgG ou LukF ou LukS recombinante ont été incubés avec des quantités connues d’IgG humaines suivies d’anticorps de lapin contre la molécule entière IgG humaine Les densités optiques DO des puits revêtus La courbe standard a été utilisée pour quantifier l’anticorps contre LukF et LukS dans l’IgIV. L’IgIV a été la norme pour tous les tests ELISA ultérieurs pour quantifier les anticorps présents dans les échantillons de sérum des patients. Les échantillons sanguins ont été prélevés sur des volontaires adultes en bonne santé, et les PMN ont été isolés selon une méthode décrite précédemment Mesure de l’inhibition de la lyse des PMN par les anticorps PVL La fonctionnalité de l’anticorps anti-PVL a été mesurée par sa capacité à inhiber la lyse induite par PVL des PMN humains, qui a été quantifiée par des releas Nous avons incubé × des PMN humains frais, ng chacun des protéines LukF et LukS recombinantes, et un contrôle positif du sérum humain A inclus des PMN, des protéines recombinantes et une solution saline tamponnée au phosphate. Un contrôle négatif comprenait des PMN, Après centrifugation des échantillons, un ul de surnageant a été utilisé pour mesurer l’activité de LDH selon les instructions du fabricant. Le pourcentage de libération de LDH a été calculé en divisant la DO de la solution. Le titre de% inhibition a été défini comme la plus faible dilution du sérum entraînant une inhibition de l% de la lyse induite par PVL des PMNsurmonter l’anticorps contre les protéines de surface S aureus Déterminer une relation potentielle entre anticorps anti-PVL et anti-S aureus protéines, nous avons mesuré des anticorps dirigés contre des cellules entières de la souche S aureus LAC par ELISA et, à partir de dilutio en série Nous avons comparé les EC entre les groupes infectés par le SARM et les témoins, et nous avons cherché des corrélations entre les valeurs EC, le jour de la maladie, et les niveaux d’anticorps LukF et LukSAnalyse statistique Tendances des niveaux d’anticorps à Figures – Les différences de titrage en% d’inhibition ont été analysées en utilisant un test de Wilcoxon avec une approximation t comparant des paires de groupes sélectionnés. Les différences de valeurs EC ont été comparées en utilisant un test de Kruskal-Wallis. Les analyses ont été effectuées en utilisant le logiciel statistique SAS, la version SAS Institute Corrélations entre le titre et les niveaux d’anticorps PVL, EC et jour de maladie, et les niveaux d’anticorps EC et PVL ont été déterminés par analyse de corrélation et valeur de Spearman. Les valeurs P de ⩽ ont été considérées comme statistiquement significatives

Figure Vue largeDownload slideAntibody to Panton-Valentine leucocidine PVL au cours du temps chez les enfants atteints d’infection à SARM Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline PVL positive avec ou sans infection antérieure à SARM ou infection cutanée et des tissus mous Les points SSTI représentent les anticorps IgG contre LukF A et LukS B dans Enfants atteints d’infection à SARM PVL positive, y compris échantillons sériques d’enfants porteurs d’une infection antérieure à SARM ou SSTI et échantillons sériques d’enfants sans antécédent d’infection à SARM ou SSTI, relevés par jour de maladie Chaque patient avait des échantillons sériques et différents obtenus à différents jours de maladie L’analyse statistique a été effectuée par régression logistique en contrôlant l’âge des patients et les échantillons multiples. Des augmentations significatives des taux d’anticorps au cours du temps ont été trouvées pour les enfants sans infection antérieure par MRSA ou lignes pointillées SSTI; ¶P =; †† P = pour la tendance à la hausse de l’augmentation du taux d’anticorps par jour de maladie, mais pas pour les enfants ayant une infection antérieure par le SARM ou des lignées solides SSTI; ¶P & gt; PVD au cours du temps chez les enfants atteints d’infection à SARM Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline positive, avec ou sans antécédent d’infection à SARM ou infection de la peau et des tissus mous SSTI Les points représentent les anticorps IgG anti-LukF A et LukS B chez les enfants infectés par MLSA PVL, y compris les échantillons sériques d’enfants ayant une infection antérieure par MRSA ou SSTI et les échantillons sériques d’enfants sans antécédent d’infection à SARM ou SSTI, par jour de maladie. Les analyses statistiques ont été effectuées par régression logistique en contrôlant l’âge des patients et les échantillons multiples. Des augmentations significatives des taux d’anticorps au fil du temps ont été observées chez les enfants sans antécédent d’infection à SARM ou de pointillés SSTI; ¶P =; †† P = pour la tendance à la hausse de l’augmentation du taux d’anticorps par jour de maladie, mais pas pour les enfants ayant une infection antérieure par le SARM ou des lignées solides SSTI; ¶P & gt; pour la tendance à la hausse de l’augmentation du taux d’anticorps par jour de maladie

Résultats

Les caractéristiques démographiques des enfants infectés par le SARM sont fournies dans le tableau Aucune différence statistique n’a été trouvée dans le sexe, l’âge ou la distribution raciale entre les enfants PVL-positifs ou PVL-négatifs Infections à SARM Les enfants ayant des infections à S aureus PVL-négatives étaient plus susceptibles d’avoir eu une exposition associée aux soins de santé P & lt; et une infection invasive P =, une constatation conforme à l’épidémiologie établie de l’infection à SARM-C et à l’infection nosocomiale à SARM

Tableau View largeTélécharger slideCaractéristiques des enfants atteints de Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline MRSA InfectionTable View largeTélécharger slideCaractéristiques des enfants atteints de Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline Infection à MRSAQuantification des anticorps dirigés contre LukF et LukS dans le sérum humain Le lot d’IgIV utilisé comme standard pour chaque test contient, ng / mL et, ng / mL d’anticorps contre LukF et LukS, respectivement Les courbes standard obtenues à partir de l’IVIG étaient reproductibles avec des pentes moyennes du% d’intervalle de confiance, – et% intervalle de confiance, – pour l’anticorps contre LukF et LukS, respectivement. Les anticorps dirigés contre les protéines LukF et LukS chez les témoins sains variaient de non détectables à, et, ng / mL, respectivement. Les tendances associées à l’âge dans les niveaux d’anticorps à la fois LukF et LukS étaient non linéaires mais significatives P & lt; , avec des niveaux plus élevés chez les enfants âgés de – mois, des niveaux plus bas chez les nourrissons âgés – mois Les niveaux d ‘anticorps dirigés contre les protéines LukF et LukS dans les échantillons de sérum prélevés le plus près de l’ apparition de l ‘infection chez les enfants atteints de PVL – positif ou de PVL ont été observés chez les enfants infectés par le SARM et chez les sujets témoins non infectés. Les infections à MRSA et les témoins négatifs sont illustrés aux figures C et D. Après contrôle de l’âge du patient et du jour de la maladie, les taux d’anticorps anti-LukF étaient significativement plus élevés. Figure C Aucune différence significative n’a été trouvée entre les niveaux d’anticorps dirigés contre LukF dans ces échantillons sériques initiaux d’enfants atteints de SARM positif à la PVL et de ceux ayant des infections à SARM à PVL négatif P = ou entre les niveaux d’anticorps dirigés contre LukF dans les échantillons sériques obtenus chez des enfants atteints d’infections à SARM négatives au PVL et chez des témoins non infectés P = Figure CS Les taux d’anticorps dirigés contre LukS étaient significativement plus élevés P & lt; Figure D Une fois de plus, comme pour les niveaux d’anticorps dirigés contre LukF, les niveaux d’anticorps dirigés contre LukS n’étaient pas différents entre les échantillons de sérum prélevés dans le sérum et les patients. enfants atteints d’infections PVL-positives et PVL-négatives P = Contrairement aux taux d’anticorps anti-LukF, les taux d’anticorps anti-LukS étaient légèrement plus élevés dans les échantillons sériques des enfants infectés par le virus MRSA PVL-négatif que chez les témoins. infection à SARM antérieure ou SSTI a été associée à des niveaux significativement élevés d’anticorps à la fois LukF P = et LukS P = dans les échantillons de sérum obtenus le plus proche de l’infection Tableau Autres prédicteurs potentiels des niveaux d’anticorps, y compris le jour de la maladie, un contact domestique avec Infection à SARM ou SSTI, statut PVL de la souche infectante, et la catégorie de la maladie à SARM invasive ou SSTI, ne sont pas associés indépendamment wi Des niveaux élevés d’anticorps dirigés contre LukF ou LukS En analyse multivariée contrôlant tous les prédicteurs potentiels sauf une infection au MRSA ou un contact SSTI, seule une infection antérieure par le SARM ou SSTI restait significativement associée à des niveaux élevés de LukF et LukF P = et respectivement était également associé à des niveaux d’anticorps plus élevés à LukF P = et LukS P = à l’analyse multivariée

Diapositives potentielles des niveaux d’anticorps aux niveaux LukF et LukSAntibody aux protéines PVL chez les enfants atteints d’infections à SARM Parce qu’il est probable que de nombreuses infections à S aureus, en particulier les infections invasives, sont précédées après une période de colonisation et / ou d’infection cliniquement inapparente pouvant potentiellement induire des anticorps anti-S aureus avant les symptômes d’infection, nous avons analysé les niveaux d’anticorps dirigés contre LukF et LukS dans les échantillons sériques obtenus le plus près du début de l’infection par SARM-PVL. Nous avons également comparé ces groupes avec ceux qui avaient des infections invasives à SARM. Après contrôle de l’âge et du jour de la maladie, nous n’avons trouvé aucune différence significative entre les niveaux d’anticorps dirigés contre LukF ou LukS entre les enfants ayant une infection à SARM ou SSTI et les enfants Figure Cependant, les enfants atteints de SSTI associée au SARM positif à la PVL et ayant déjà eu une infection à SARM ou SSTI présentaient des taux significativement plus élevés d’anticorps dirigés contre LukF et LukS que les enfants présentant des infections invasives. avec SSTI associé à SARM sans antécédents d’infection à MRSA ou SSTI P = pour les deux comparaisons Figure

Figure Vue largeDownload slideEnfants atteints de leucocidine Panton-Valentine Infection à SARM Staphylococcus aureus résistante à la méthicilline PVL positive et infection à SARM ou infection de la peau et des tissus mous antérieure SSTI présentait des taux plus élevés d’anticorps contre la PVL que les enfants sans antécédent d’infection à SARM ou points SSTI Les anticorps IgG dirigés contre LukF et LukS et les lignées représentent les taux médians d’anticorps chez les enfants infectés par MLSA PVL, y compris les enfants ayant déjà eu une infection à SARM ou SSTI, les patients sans infection à SARM ou SSTI et les patients avec infection invasive. anticorps contre LukF chez les enfants ayant une infection antérieure par MRSA ou SSTI, aucune infection antérieure par MRSA ou SSTI, et une infection invasive étaient ng / mL intervalle interquartile [IQR], -, ng / mL, ng / mL IQR, – ng / mL, et ng / mL d’IQR, -, ng / mL, respectivement, et à LukS étaient ng / mL IQR, -, ng / mL, ng / mL IQR, – ng / mL, et ng / mL IQR, -, ng / mL, respectivement Il n’y avait pas de différence dans les niveaux d’un Chez les enfants atteints d’infection à SARM invasive PVL-positive dans des échantillons sériques prélevés le plus près du début de l’infection, l’analyse statistique a été effectuée par régression logistique en fonction de l’âge et du jour de la maladie.Figure Voir grandDownload slideChildren with Panton- Infection à SARM Staphylococcus aureus résistante à la méthicilline PVL et infection à SARM ou infection de la peau et des tissus mous SSTI présentait des taux d’anticorps anti-PVL supérieurs à ceux des enfants sans antécédent d’infection à SARM ou des points SSTI représentaient des niveaux d’anticorps IgG contre LukF et LukS et les lignes représentent les niveaux d’anticorps médians chez les enfants atteints d’infection à SARM PVL positive, y compris les enfants ayant déjà une infection à SARM ou SSTI, les patients sans infection à SARM ou SSTI, et les patients avec infection invasive. Infection à MRSA ou SSTI, aucune infection antérieure à SARM ou SSTI, et inva infection sive étaient ng / ml gamme interquartile [IQR], -, ng / mL, ng / mL IQR, – ng / mL, et ng / mL IQR, -, ng / mL, respectivement, et à LukS étaient ng / mL IQR , -, ng / mL, ng / mL IQR, – ng / mL, et ng / mL IQR, -, ng / mL, respectivement Il n’y avait pas de différence dans les niveaux d’anticorps contre PVL chez les enfants atteints d’infection invasive à SARM MRSA chez les enfants. L’analyse statistique a été effectuée par régression logistique en contrôlant l’âge et le jour de la maladie. Changements dans les taux d’anticorps aux protéines PVL à la suite de l’infection à SARM Pour déterminer si une réponse immunitaire à des anticorps anti-MRSA Les protéines PVL étaient une conséquence de l’infection par MRSA produisant la PVL, nous avons mesuré les anticorps dirigés contre LukF et LukS dans tous les échantillons de sérum disponibles. Les niveaux d’anticorps dirigés contre LukF et LukS chez les enfants infectés par MLSA PVL-positive augmentaient en fonction du jour de la maladie. et P =, respectivement Figure A et B, alors que les taux d’anticorps anti-LukF et LukS chez les enfants atteints d’infections à SARM PVL-négatives n’augmentaient pas de manière significative en comparant les changements des taux d’anticorps aux protéines PVL. SARM négatif, les différences entre les pentes étaient également significativement différentes P = et, respectivement Figure A et B

Figure Vue largeDownload slideAntibody to Panton-Valentine leucocidine PVL au cours du temps chez les enfants atteints d’infection à SARM Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline PVL-positif ou PVL-négatif Les points représentent les anticorps IgG contre LukF A et LukS B dans les échantillons sériques d’enfants atteints de SARM positif. Chaque patient avait des échantillons sériques et des échantillons de sérum obtenus à différents jours de la maladie. L’analyse statistique a été réalisée par régression logistique en contrôlant l’âge du patient et les échantillons multiples Augmentations significatives des taux d’anticorps au fil du temps ont été trouvés pour les enfants atteints de SARM positif au PVL * P & lt; pour la tendance ascendante dans la pente individuelle et P = pour la comparaison avec la pente de la ligne pour les niveaux d’anticorps chez les enfants atteints de SARM négatif à la PVL; † P = pour la tendance ascendante de la pente individuelle et pour la comparaison avec la pente de la ligne pour les taux d’anticorps chez les enfants atteints de SARM sans PVL Aucune augmentation significative de l’anticorps anti-LukF ou LukS n’a été détectée chez les enfants atteints de SARM ; PVL au cours du temps chez les enfants atteints d’infection à SARM Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline PVL-positif ou PVL-négatif Les points représentent les anticorps IgG dirigés contre LukF A et LukS B dans les échantillons de sérum prélevés dans le sérum. Chaque enfant avait des échantillons de sérum et de sérum obtenus à différents jours de la maladie. L’analyse statistique a été effectuée par régression logistique en contrôlant l’âge du patient et les échantillons multiples. Des augmentations significatives des taux d’anticorps au fil du temps ont été observées chez les enfants atteints de SARM positif au PVL * P & lt; pour la tendance ascendante dans la pente individuelle et P = pour la comparaison avec la pente de la ligne pour les niveaux d’anticorps chez les enfants atteints de SARM négatif à la PVL; † P = pour la tendance ascendante de la pente individuelle et pour la comparaison avec la pente de la ligne pour les taux d’anticorps chez les enfants atteints de SARM sans PVL Aucune augmentation significative de l’anticorps anti-LukF ou LukS n’a été détectée chez les enfants atteints de SARM ; Les taux d’anticorps dirigés contre LukF et LukS ont augmenté lorsqu’ils ont été relevés par jour de maladie chez les enfants atteints d’une infection à SARM positive au PVL et sans antécédent d’infection à SARM ou SSTI P = et, respectivement Figure A et B, mais enfants atteints d’une infection antérieure par MRSA ou SSTI Ainsi, une infection initiale MLSA PVL-positive a produit une réponse anticorps robuste à PVL, mais une infection ultérieure n’a pas encore augmenter les niveaux d’anticorpsNeutralisation de l’anticorps anti-PVL chez les patients infectés par SARM et les contrôles des titres d’inhibition ont été détectés chez des patients convalescents à partir d’un échantillon de sérum infecté à SARM positif, infecté par MRSA, obtenu après le jour de la maladie et chez ceux ayant un SSTI PVL positif ayant déjà eu une infection à SARM ou SSTI. % de titres d’inhibition par rapport aux échantillons sériques de tous les autres groupes, y compris les échantillons sériques de phase aiguë obtenus avant le jour de la maladie f des patients atteints d’une infection invasive à SARM positive, des patients sans antécédent d’infection à SARM, des patients sans infection à SARM ou à SSTI, des patients avec des infections à SARM sans PVL et des sujets témoins. La capacité des échantillons sériques à inhiber le PVL induit La lyse des PMN est significativement corrélée avec le taux global d’anticorps dirigés contre LukF et LukS r = [P & lt;] et r = [P & lt;], indiquant que la majorité de l’anticorps anti-PVL dans le sérum exerce une activité neutralisante.

Les barres PVL représentent la valeur moyenne de la dilution sérique requise pour inhiber ⩾% de la cytotoxicité induite par la PVL, et les barres d’erreur les erreurs standard de la moyenne. Les patients incluent les enfants avec SSTI associé à MRSA PVL-positif avec antécédents d’infection à SARM ou SSTI, enfants atteints de SSTI associée à SARM PVLpositive sans infection antérieure par MRSA ou SSTI, enfants ayant des échantillons sériques d’infection à SARM invasive résistante au PVL convalescents obtenus après le jour de la maladie, enfants atteints d’infections aiguës à virus MRSA invasives PVL jour de la maladie, les enfants atteints d’infection à SARM sans PVL, et les sujets témoins L’analyse statistique a été réalisée par un test de Wilcoxon – échantillon avec approximation t * P & lt ;, comparé au groupe d’infection invasive à PVLS et PVRS positif; §P & lt ;, comparé avec le SSTI associé à la MRSA PVL-positive avec une infection antérieure par MRSA ou un groupe SSTI; ¶Pp, comparé au SSTI associé à la MRSA PVL-positif avec une infection antérieure par MRSA ou un groupe SSTI. View largeTéléchargement des lamesLes réponses d’anticorps neutralisants aux barres PVL de leucocidine Panton-Valentine représentent la valeur moyenne de la dilution sérique requise pour inhiber ⩾% de la cytotoxicité induite par PVL, et Les patients comprennent les enfants ayant une infection à MRSA associée à un MRSA avec une infection antérieure par MRSA ou un SSTI, les enfants atteints d’infection à MRSA associée au SARM et sans infection antérieure au MRSA ou au SSTI, les enfants ayant des sérums d’infection MRSA invasifs PVL positifs et convalescents. après le jour de la maladie, les enfants atteints d’infections aiguës à virus MRSA invasif PVL échantillons sériques obtenus avant le jour de la maladie, les enfants atteints d’infection à SARM sans PVL, et les sujets témoins L’analyse statistique a été réalisée par un test de Wilcoxon avec approximation * P & lt ;, comparé au groupe d’infection MRSA invasif PVL-positif convalescentphase; §P

Discussion

Nos données montrent qu’après contrôle du jour de la maladie, de l’âge, des antécédents d’infection et du statut PVL de l’isolat MRSA infectant, les valeurs initiales de l’anticorps anti-PVL chez les enfants atteints de SSTI et de maladie invasive étaient similaires. ] ont rapporté des taux d’anticorps anti-PVL dans des échantillons sériques appariés de patients avec SSTI PVL négatif et PVL positif et des infections invasives Ils ont trouvé une augmentation plus importante des taux d’anticorps PVL chez les patients PVL-positifs que chez PVL-négatifs. Il est intéressant de noter que les patients atteints d’une furonculose récidivante présentaient un taux d’anticorps anti-PVL élevé, qui n’a pas augmenté au fil du temps. Nos données concordent avec ces résultats dans les concentrations d’anticorps dans les échantillons de sérum provenant de patients atteints de SSTI ou d’une maladie invasive étaient similaires dans les échantillons de sérum initial. Cependant, notre cohorte comprenait beaucoup plus de patients En contrôlant pour d’autres facteurs, seuls des antécédents de maladie récurrente étaient associés à des taux élevés d’anticorps anti-VLP afin d’évaluer le taux de récurrence dans notre population, nous avons examiné les dossiers de l’Hôpital pour enfants de Boston et avons constaté que% d’enfants SSTI associé à un SSTI antérieur associé à SARM De tous les isolats SSTI associés à SARM obtenus durant cette période,% provenaient d’enfants qui avaient ou qui développeraient ultérieurement un SSTI récidivant lié à MRSA, des données non publiéesLa conception de la recherche et les limites actuelles de l’analyse Nous avons exclu les enfants ayant eu une infection concomitante par des examens médicaux, bien que l’historique complet de ces infections n’ait pas été disponible. Par conséquent, certains enfants témoins ont pu avoir une colonisation ou une infection à SARM. de la prévalence de la colonisation nasale SARM à Boston est de & lt;% chez les enfants Deuxièmement, nous n’incluions les enfants dans cette étude que si un échantillon de sang concomitant était disponible. Il est possible que les enfants qui ont eu un prélèvement sanguin soient différents de ceux qui ont été traités pour le SARM. infection en l’absence d’autres examens de laboratoire Malgré cette limitation potentielle, les échantillons de sérum que nous avons comparés provenaient d’enfants atteints de SSTI associé à SARM avec ou sans antécédent d’infection à SARM ou de SSTI chez qui le sang avait été prélevé et qui représentaient vraisemblablement des patients avec des sévérités comparables. définition des enfants ayant une infection antérieure par MRSA ou SSTI, nous avons inclus les enfants ayant des antécédents de SSTI sans d’autres données microbiologiques Étant donné les taux élevés de récidive de SARMoc, fréquemment associés à la même souche , nous croyons qu’il était approprié de supposer que les enfants ayant un SSTI associé à la MLS-PVL-positive et des antécédents de SSTI ont probablement eu une infection au MRSA PVL-positive par le passé Y compris les enfants ayant un antécédent SSTI non dû à un S aureus producteur de PVL aurait probablement réduit les niveaux globaux d’anticorps anti-PVL dans ce groupe. Cette possibilité n’annule donc pas la conclusion majeure de cette étude que l’anticorps cytotoxique neutralisant la PVL est élevé chez les enfants atteints de SSTI associé au SARM et de SSTI récidivant et donc d’anticorps contre la PVL n’est pas associé à la protection contre l’infection Enfin, les anticorps mesurés aux composants de la protéine PVL peuvent différer des anticorps qui se lient à la protéine après oligomérisation. corrélation étroite nous avons détecté entre la capacité de neutralisation cytotoxique contre PVL fonctionnelle et la concentration d’anticorps mesurés dans les échantillons de sérum aux protéines individuelles LukF et LukS, nous présumerions que les anticorps se liant à PVL oligomérisés sont présents en quantités proportionnelles à celles pour le LukF individuel et Protéines LukS En résumé, nous avons trouvé que les réponses d’anticorps acquises à PVL chez l’enfant ren sont typiques de ceux associés aux réponses à d’autres antigènes bactériens, avec des taux plus élevés chez les nouveau-nés comparés aux enfants mois à années probablement en raison du transfert transplacentaire des IgG maternelles. chez les enfants atteints d’infections à SARM sans PVL Des antécédents d’infection à SARM ou SSTI antérieurs étaient fortement associés à des niveaux élevés d’anticorps neutralisant la cytotoxine dans l’échantillon de sérum prélevé le plus près de l’apparition du SSTI associé au SARM subséquent. les niveaux fonctionnels d’anticorps anti-PVL chez les enfants infectés antérieurement ne protègent pas contre le SSTI associé au PVL positif et PVL positif, et l’inclusion de la composante LukS du PVL dans les vaccins expérimentaux en cours de développement pour l’infection à S aureus peut offrir peu d’avantages. effets préjudiciables potentiels dans le contexte de l’augmentation de la susceptibilité aux infections sur

Remerciements

Nous remercions M Otto d’avoir fourni la souche S aureus LAC Nous remercions Dionne Graham, Jing Zhou et Leslie Kalish du programme de recherche clinique, Hôpital pour enfants de Boston, d’avoir révisé l’analyse statistique de nos données. Soutien financier Cette recherche a été soutenue par les National Institutes of Health L’AI délivre l’IA auprès de l’Institut National des Allergies et des Maladies Infectieuses Conflits d’intérêts potentiels GP a reçu des conseils de Boehringer Ingelheim, de Cangene Corp, de Selecta Biosciences, d’AMGEN et d’Astra-Zenica et de licences de GlaxoSmithKlein, Alopexx Pharmaceuticals et Sanofi Aventis Tous les autres auteurs: aucun conflit